Introduction :
L’incidence du carcinome hépatocellulaire (CHC) est en continuelle augmentation, due à l’émergence de la stéatohépatite non alcoolique (NASH)1, caractérisée par une inflammation et une mort des hépatocytes. La protéine MLKL, exécutrice de la mort par nécroptose, serait à priori impliquée dans le développement de la NASH2. De plus, un rôle anti ou pro-tumoral a été décrit pour cette protéine, selon les tissus3. Cependant son implication dans le développement du CHC au cours d’une NASH reste inconnue.

Patients et méthodes / ou matériel et méthodes :
Pour évaluer le rôle de MLKL dans le développement du CHC au cours d’une NASH, nous introduisons des souris avec une invalidation du gène Mlkl au niveau des cellules parenchymateuses du foie (MlklLPC-KO), ainsi que leurs contrôles Mlklfl/fl, dans un protocole expérimental mimant la pathogenèse humaine4,5. Il consiste à induire un diabète chez des souriceaux mâles 2 jours après leur naissance qui, après sevrage, sont soumis à un régime alimentaire riche en lipides et en glucides (high-fat high-sugar diet, HFHSD) pendant 4, 8 ou 12 semaines. Diverses investigations clinicopathologiques, comprenant des analyses histologiques et moléculaires du foie complétées par des marquages immunohistochimiques, des immunomarquages, et la mesure des transaminases plasmatiques, sont réalisées par la suite.

Résultats : Les principaux résultats obtenus jusque-là montrent que :

– L’absence de MLKL dans les cellules parenchymateuses du foie n’induit aucun impact décelable sur les dommages hépatiques, la stéatose ou encore la fibrose hépatique.
– La splénomégalie, de même que l’inflammation intrahépatique, s’établit de manière retardée chez les souris MlklLPC-KO comparées aux contrôles Mlklfl/fl.
– Les souris MlklLPC-KO développent significativement moins de lésions nodulaires et de tumeurs hépatiques. De plus, ces dernières étaient de plus petites tailles comparées à celles des contrôles.
– Les souris MlklLPC-KO présentent une tendance à la diminution de l’incidence des CHC après 8 semaines, qui devient significative à 12 semaines de régime HFHSD.
– Enfin, le marquage de la glutamine synthétase (GS), un marqueur de CHC, a révélé une différence significative, avec moins de tumeurs GS+ chez les souris MlklLPC-KO comparées aux contrôles.
Enfin, en vue du rôle pivot de l’inflammation dans la pathogénèse de la NASH et du CHC, nous comptons, entre autres, approfondir nos investigations sur la réponse immunitaire en caractérisant par immunohistochimie multiplexe la distribution des cellules immunitaires au niveau de la rate et du foie, ainsi qu’au niveau du microenvironnement tumoral chez les deux groupes de souris.

Conclusion :
La délétion de Mlkl dans les cellules parenchymateuses du foie n’induit aucun effet décelable sur l’atteinte hépatique, la stéatose et la fibrose, par contre, elle diminue significativement l’inflammation intrahépatique et induit un ralentissement prononcé dans l’apparition du CHC, chez des souris soumises au protocole expérimental reproduisant une NASH évoluant en carcinome hépatocellulaire.

Les auteurs déclarent ne pas avoir de conflit d’intérêt

Remerciements :
Nous remercions la Fondation pour la Recherche Médicale (FRM) ainsi que la Ligue Contre le Cancer pour le soutien financier qu’ils ont apporté à ce projet.
Nous tenons également à remercier toutes les structures qui accueillent et qui contribuent à ce projet : l’Université de Rennes, l’EHESP, l’IRSET, l’INSERM et les plateformes de BIOSIT à savoir H2P2 pour les expériences d’immunohistochimie ainsi que l’animalerie ARCHE, nous remercions également le laboratoire de Biochimie-Toxicologie du CHU de Rennes pour les mesures de transaminases.

Références :
(1) Huang DQ, El-Serag HB, Loomba R. Global epidemiology of NAFLD-related HCC: trends, predictions, risk factors and prevention. Nat Rev Gastroenterol Hepatol. 2021 Apr;18(4):223-238. doi: 10.1038/s41575-020-00381-6. Epub 2020 Dec 21. PMID: 33349658; PMCID: PMC8016738.
(2) Schwabe RF, Luedde T. Apoptosis and necroptosis in the liver: a matter of life and death. Nat Rev Gastroenterol Hepatol. 2018 Dec;15(12):738-752. doi: 10.1038/s41575-018-0065-y. PMID: 30250076; PMCID: PMC6490680.
(3) Martens S, Bridelance J, Roelandt R, Vandenabeele P, Takahashi N. MLKL in cancer: more than a necroptosis regulator. Cell Death Differ. 2021 Jun;28(6):1757-1772. doi: 10.1038/s41418-021-00785-0. Epub 2021 May 5. PMID: 33953348; PMCID: PMC8184805.
(4) Fujii M, Shibazaki Y, Wakamatsu K, Honda Y, Kawauchi Y, Suzuki K, Arumugam S, Watanabe K, Ichida T, Asakura H, Yoneyama H. A murine model for non-alcoholic steatohepatitis showing evidence of association between diabetes and hepatocellular carcinoma. Med Mol Morphol. 2013 Sep;46(3):141-52. doi: 10.1007/s00795-013-0016-1. Epub 2013 Feb 22. PMID: 23430399.
(5) Simoes Eugénio M, Farooq M, Dion S, Devisme C, Raguenes-Nicol C, Piquet-Pellorce C, Samson M, Dimanche-Boitrel MT, Le Seyec J. Hepatocellular Carcinoma Emergence in Diabetic Mice with Non-Alcoholic Steatohepatitis Depends on Diet and Is Delayed in Liver Exhibiting an Active Immune Response. Cancers (Basel). 2020 Jun 8;12(6):1491. doi: 10.3390/cancers12061491. PMID: 32521615; PMCID: PMC7352283.